香菇酱作为香菇的柱前中甲加工制品,是衍生一种大众乐见餐桌上的调味酱,但是法检由于香菇作为香菇酱的主要原材料之一,其甲醛含量偏高,测香甲醛对皮肤和黏膜具有强烈的刺激作用。香菇在加工保藏过程中依旧含有甲醛残留,菇酱如高温导致的美拉德反应;加工过程会影响香菇自身代谢从而产生甲醛;包装会有甲醛的迁移或污染等。 高效液相色谱法具有检测限低等优势,柱前中甲基于此,衍生开发出一种适合香菇酱特性的法检稳定可靠的甲醛检测方法。 1 材料与方法1.1 试剂与仪器1.1.1 试剂甲醛标准溶液(100 mg/L)、测香乙腈(色谱纯)、菇酱2,柱前中甲4-二硝基苯肼(色谱纯)、硫酸铵(分析纯)、衍生冰醋酸(分析纯):麦克林试剂有限公司;醋酸钠(分析纯):天津市大茂化学试剂厂。法检 1.1.2 仪器Waters 2695高效液相色谱仪(配紫外检测器) Waters 公司;分析天平 赛多利斯科学仪器(北京)有限公司;THZ-82A超级恒温水浴振荡器 常州澳华仪器有限公司;3K15高速台式离心机 Sigma 离心机(扬州)有限公司;pH计 上海精密仪器仪表有限公司。测香 1.2 试验方法1.2.1 样品处理将样品充分匀浆,菇酱准确称取样品10.00 g, 置于50 mL具塞塑料离心管中,准确加入20 mL衍生缓冲液,盖紧盖子,涡旋混匀后置于60 ℃,150 r/min水浴锅中,振摇1 h, 然后冷却至室温。加入5 g硫酸铵,涡旋混匀,以8000 r/min离心10 min后,移取上清液于具塞试管中,下层溶液用10.0 mL乙腈重复萃取1次,离心,合并上清液,用乙腈定容至20.0 mL,混匀,过0.22 μm微孔滤膜,待HPLC检测。 1.2.2 甲醛标准溶液的制备分别吸取0,0.1,0.2,0.3,0.4,0.5 mL的甲醛标准溶液,加衍生缓冲液定容至20 mL,配制成0,0.5,1,1.5,2,2.5 μg/mL的标准溶液,盖紧盖子,涡旋混匀后置于60 ℃,150 r/min水浴锅中,振摇1 h, 然后冷却至室温,过0.22 μm微孔滤膜,待HPLC检测,以甲醛的质量浓度作为横坐标(X),以峰面积为纵坐标(Y),绘制甲醛溶液标准曲线。 1.2.3 色谱条件参考色谱条件并加以改进,色谱柱:Agilent TC-C18(250 mm×4.6 mm, 5 μm);柱温25 ℃;紫外检测器;检测波长352 nm; 流动相:乙腈-水(70∶30,V/V),进样量10 μL;流速1 mL/min, 等度洗脱。
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